肿瘤qPCR阳性对照 肿瘤学pcr是什么

肿瘤PCR的概念

肿瘤PCR(聚合酶链式反应)是一种在肿瘤检测中应用的高灵敏度分子生物学技术。它通过体外酶法合成特定DN段，包括高温变性、低温退火和适当温度延伸等反应循环，快速扩增目标DNA。在肿瘤学中，PCR主要有两种含义：

1. 检测方法：用于检测肿瘤细胞和基因突变，具有很高的灵敏性和特异性。通过荧光信号检测，可用于肿瘤定量研究和基因检测。

2. 治疗效果评估：指病理完全缓解(pathological complete remission)，即肿瘤经治疗后病理检查无残留肿瘤细胞。特别是对于乳腺癌等肿瘤，PCR表示原发病灶和淋巴结中均检查不到癌细胞的理想状态。

qPCR(实时荧光定量PCR)

qPCR是在PCR基础上发展起来的第二代PCR技术，具有以下特点：

qPCR实验中的阳性对照

在肿瘤qPCR实验中，阳性对照是确保实验可靠性的关键环节，主要包括：

1. 扩增对照：使用含有目标基因的质粒、假病毒或基因组DNA作为标准，验证PCR扩增体系的效能

2. 阳性样本对照(PCS)：对已知阳性样本进行独立提取和PCR扩增，验证实验方法的可靠性

3. 内部阳性对照(IPC)：在核酸提取前向样本中添加外源核酸，通过比较Ct值评估核酸提取效率

4. 内参基因：如GAPDH、β-actin等在各组织中表达相对稳定的基因，作为检测基因表达水平变化的参考

合理使用这些对照可以大大提高qPCR实验的准确性和可靠性，特别是在肿瘤分子诊断和疗效监测中。