肿瘤切片免疫 肿瘤组织切片免疫荧光

肿瘤切片免疫和肿瘤组织切片免疫荧光是病理诊断和肿瘤微环境研究中的重要技术，主要基于抗原-抗体特异性结合原理，通过荧光或酶标记实现对肿瘤标志物的定位、定性和定量分析。以下是相关技术要点和应用场景的

一、技术原理与分类

1. 免疫染色技术

2. 免疫荧光（IF）与免疫组化（IHC）区别

二、实验流程关键步骤

免疫荧光（IF）操作流程

1. 样本制备：OCT包埋的肿瘤组织经冰冻切片（5μm），复温后4%多聚甲醛固定。

2. 封闭与孵育：血清封闭非特异性位点，一抗（如CD31）4℃过夜孵育，二抗（如AF 488标记）避光反应。

3. 封片与观察：抗淬灭封片剂封片，荧光显微镜下分析。

免疫组化（IHC）核心步骤

1. 抗原修复：加热或酶处理暴露抗原表位。

2. 抗体标记：一抗特异性结合后，酶标二抗显色（如DAB）。

3. 复染与判读：苏木素复染细胞核，光学显微镜下评估标志物表达。

三、临床应用与意义

1. 肿瘤诊断与分型

2. 治疗指导与预后

3. 肿瘤微环境研究

四、技术局限性

五、新兴技术进展

如需具体实验方案或标志物选择建议，可进一步结合样本类型和科研目标细化。