肿瘤细胞耐药性 肿瘤细胞耐药性实验
恶性肿瘤 2025-08-10 13:30恶性肿瘤www.zhongliuw.cn
肿瘤细胞耐药性是癌症治疗中的主要挑战之一,近年来在机制研究和实验方法方面取得了多项重要进展。
肿瘤细胞耐药机制
1. 关键分子机制:
2. 代谢机制:
肿瘤耐药性实验方法
1. 耐药细胞系构建
基本原理:
实验步骤:
1. 测定亲本细胞的IC50值
2. 使用起始浓度为IC50 1/10-1/5的药物处理对数期细胞
3. 药物处理2小时后更换新鲜培养基(间歇诱导法)或持续处理至细胞恢复生长
4. 重复处理6-8次后提高药物浓度
5. 计算耐药指数(RI=耐药细胞IC50/亲本细胞IC50),RI>5视为成功
示例方案:
2. IC50测定(半抑制浓度测定)
实验材料:
操作流程:
1. 将对数期细胞接种于96孔板
2. 加入系列浓度药物(如0.1-10μM),建议先大梯度(如10倍)后小梯度(2倍)稀释
3. 孵育72小时后加入MTT溶液(5mg/mL,20μL/孔)
4. 继续孵育3小时,测定吸光度
5. 计算IC50值
3. 耐药相关检测
前沿技术进展
1. 人工智能平台:
2. 基因组预测:
3. 单细胞技术:
4. 纳米医学:
这些研究方法和发现为理解肿瘤耐药机制和开发新型治疗策略提供了重要基础。
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