肝肿瘤病理切片(肝肿瘤病理切片怎么做)

肝肿瘤病理切片是诊断肝脏疾病尤其是肝肿瘤的金标准，通过显微镜观察肝组织细胞的形态结构变化，可以明确肿瘤性质、类型和分化程度，为临床治疗方案的制定提供决定性依据。下面将详细介绍肝肿瘤病理切片的完整制作流程、技术要点及临床应用价值。

肝肿瘤病理切片制作流程

1. 标本采集与固定

肝肿瘤标本的采集是病理切片制作的第一步，通常通过手术切除、穿刺活检或内镜下钳取获得。采集时应使用无菌器械，避免组织污染，并完整切除肿瘤及周围部分正常组织以便于观察交界区域。

固定处理：

标本离体后需在30分钟内放入固定液（常用10%中性缓冲福尔马林）

固定时间根据标本大小而定：大标本不少于6小时，小标本不少于3小时

标本与固定液比例建议1:4-20，确保充分浸没

固定温度需控制在37℃以下，防止组织过热变形

常用的固定液包括10%中性福尔马林、海利氏液（特别适合肝脏等造血器官）等。固定完成后需用流水冲洗标本，去除多余固定液。

2. 组织处理与包埋

固定后的肝组织需要经过一系列处理才能进行切片：

脱水处理：

使用梯度酒精（通常从70%到100%）逐步置换组织中的水分

脱水过程需缓慢进行，防止组织收缩变形

脱水时间根据组织大小调整，通常需要数小时

透明与浸蜡：

脱水后组织需经二甲苯等试剂透明化处理

将透明后的组织浸入熔化的石蜡中（温度约60℃）

浸蜡时间一般为2-4小时，使蜡充分渗透组织

包埋用石蜡必须过滤，确保无杂质

包埋时将处理好的肝肿瘤组织置于包埋盒中，倒入液态石蜡，冷却后形成均匀的蜡块。包埋时需注意组织的方向，确保能切出有诊断价值的切面。

3. 切片与贴片

切片过程：

使用旋转式切片机将蜡块切成3-5微米的薄片

切片刀必须保持锋利，切片厚度均匀

胃镜、穿刺等小活检组织需作连续切片，数量不少于8张

切片时应匀速操作，避免切片机震动导致厚薄不均

贴片技术：

将切好的薄片漂浮于40℃温水浴中展开

用载玻片捞取组织片，置于玻片中间位置

各块组织的方向应保持一致，便于观察

贴片后需在60℃烘箱中烘干30-60分钟

肝肿瘤病理切片染色与诊断

1. 染色技术

肝肿瘤病理切片最常用的染色方法是苏木精-伊红(HE)染色，其他特殊染色和免疫组化染色可根据诊断需要选择：

HE染色流程：

1. 切片脱蜡：二甲苯I、II各10分钟

2. 水化：梯度酒精（100%-70%）各5分钟

3. 苏木精染色：5-10分钟

4. 分化：1%盐酸酒精数秒

5. 伊红染色：1-3分钟

6. 脱水透明：梯度酒精至二甲苯

7. 封片：中性树胶封固

染色质量控制：

染色前需充分脱蜡，否则影响染色效果

染色液需定期更换，保持最佳染色效果

封片时不得有气泡和树胶外溢

标签必须贴于玻片左侧，编号清晰

2. 病理诊断要点

肝肿瘤病理诊断主要通过显微镜观察完成，需遵循系统的观察方法：

肉眼观察：

初步判断切片来自肝脏组织

观察切面色泽、质地是否均一

识别可能的病灶区域

显微镜观察：

低倍镜(10×10)：

确认肝组织结构

判断组织正常与否

定位病变区域

观察肿瘤与周围组织关系

高倍镜(10×40)：

观察肝细胞形态细节

评估核浆比例

检查核分裂象

分析肿瘤分化程度

肝细胞癌的典型病理特征包括：肝细胞异型性明显、核大浓染、核浆比增高、细胞排列紊乱等。而胆管细胞癌则表现为腺样结构、细胞立方或柱状、间质纤维组织增生等。

肝肿瘤病理切片的应用与注意事项

1. 临床应用价值

肝肿瘤病理切片在临床诊疗中具有不可替代的作用：

诊断方面：

明确肿瘤良恶性：良性肿瘤细胞形态规则，恶性肿瘤细胞异型性明显

确定肿瘤类型：如肝细胞癌、胆管细胞癌、转移性癌等

评估分化程度：高分化、中分化、低分化

检测特殊标志物：为靶向治疗提供依据

治疗指导：

手术切缘评估：判断肿瘤是否完全切除

治疗方案选择：根据病理类型决定手术、化疗或靶向治疗

预后评估：根据分化程度和浸润范围预测疾病进展

2. 质量控制要点

确保肝肿瘤病理切片质量的关键注意事项：

术前准备：

充分了解临床病史和影像学检查结果

准备齐全的取材器械：解剖刀、剪刀、镊子等

准备多种固定液以备不同需求

术中注意事项：

取材要全面，包括肿瘤组织、交界组织和正常组织

及时固定，防止组织自溶

规范标记，避免标本混淆

术后管理：

切片应在取材后2个工作日内完成

交付医师时当面清点切片数量

剩余组织妥善保存，以备后续检查

特殊类型的肝肿瘤病理检查

1. 术中冰冻切片

对于肝脏手术中的快速病理诊断，可采用冰冻切片技术：

应用场景：

手术切缘评估

肿瘤性质快速诊断

移植肝评估

技术特点：

省去脱水和浸蜡步骤，直接冷冻切片

全过程仅需15-20分钟

诊断准确性略低于常规石蜡切片

诊断挑战：

肝内胆管癌可能沿肝窦和胆管浸润性生长

转移性肿瘤需与原发肿瘤鉴别

冰冻伪影可能影响诊断

2. 肝穿刺活检切片

对于不宜手术的肝肿瘤患者，穿刺活检是重要诊断手段：

技术要点：

影像引导下准确定位穿刺

获取不少于3条组织，长度1-2cm

立即固定，防止组织破碎

病理评估：

重点观察少量组织中的特征性改变

可能需要多次切片寻找诊断依据

结合免疫组化提高诊断准确性

肝肿瘤病理切片的制作与诊断是一项复杂而精细的工作，需要病理科医生和技术人员的密切配合。从标本采集到最终诊断，每个环节都直接影响结果的准确性，因此必须严格遵循操作规程，确保为临床提供可靠的病理诊断依据。