肿瘤皮下移植瘤细胞浓度

肺部肿瘤 2025-10-27 11:44肺癌治疗www.zhongliuw.cn

在裸鼠皮下移植瘤实验中，肿瘤细胞的接种浓度是关键参数之一，直接影响成瘤效率和实验结果的可重复性。以下是综合多个实验方案总结的细胞浓度要求及注意事项：

1. 基础浓度标准

大多数实验采用的细胞悬液浓度为 1-5×10个细胞/mL，接种体积通常为0.1-0.2 mL，因此单次接种的细胞量为 1-5×10个细胞/只裸鼠。这一范围适用于多数肿瘤细胞系（如RPMI8226、MPC-11等）。

2. 浓度调整因素

细胞类型差异：部分高侵袭性细胞（如某些肉瘤细胞）可能需更低浓度（如1×10个/mL），而难成瘤细胞可提高至5×10个/mL。

基质胶辅助：若细胞成瘤能力弱，可将细胞悬液与基质胶按1:1混合，此时终浓度仍保持1-5×10个/mL。

1. 多发性瘤模型

RPMI8226细胞需接种 2×10个细胞/只（悬液浓度约1×10个/mL），且裸鼠需预先接受3Gy X射线照射以提高成瘤率。

2. 腹水瘤衍生模型

通过腹腔注射建立腹水瘤后，抽取腹水稀释至 1×10个/mL，再接种至皮下。

1. 细胞状态要求

必须使用对数生长期（80-90%汇合度）、活性＞95%的细胞，消化后需用预冷PBS清洗去除血清残留。

2. 接种时效性

细胞悬液制备后需在30分钟内完成接种，全程冰上保存以维持活性。

3. 注射技巧

针头需深入皮下约1cm，注射后停留几秒防渗漏，接种部位优先选择血供丰富的腋窝或腹股沟区。

若需进一步优化浓度，建议通过预实验（每组3只）测试不同梯度，再根据成瘤率调整正式实验方案。